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东南仪诚为你揭秘电泳原理

2023年01月26日 11:58:31      来源:北京东南仪诚实验室设备有限公司广州分公司 >> 进入该公司展台      阅读量:0

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    电泳的原理是什么?东南仪诚为你揭秘电泳原理。

    电泳是带电颗粒在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象。在一定pH条件下,每一种分子都具有特定的电荷(种类和数量)、大小和形状,在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同,各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理

    影响泳动度的因素

    1.电场强度:

    电场强度是指每厘米的电位降,也称电位梯度(电势梯度)。电场强度越高,则带电颗粒泳动越快。根据电场强度的不同,电泳可分为:常压(100-500V)电泳。其电场强度为2-10V/cm。分离时间较长,从数小时到数十小时,适合于分离蛋白质等大分子物质。

    2溶液的性质

    1)PH值

    溶液的PH决定带电颗粒的解离程度,也即决定其带静电荷的量。对蛋白质而言,溶液pH值离等电点越远,则颗粒所带的净电荷越多,泳动速度也越快;反之,则越慢。因此分离某种蛋白质混合液时,应选择合适的pH,使欲分离的各种蛋白质所带的电荷数量有较大的差异

    2)离子强度

    溶液的离子强度一般在0.02-0.2之间,电泳较合适。若离子强度过高,则会降低颗粒泳动速度;若离子强度过低,则缓冲能力差,往往会因为溶液PH值的变化而影响泳动度的速率。

    3)溶液黏度

    泳动度与溶液黏度是成反比关系

    3颗粒性质

    颗粒直径、形状以及所带静电荷量对泳动度有较大的影响。一般来说,颗粒的静电荷量越大,或其直径越小,或其形状越接近球形,在电场中的泳动速度就越快。反之,则越慢

    4电渗

    电泳缓冲液相对于固体支持物的移动称电渗。当支持物不是惰性物质时,常会因为支持物上存在的离子基团如羧基、羟基等吸附电极溶液中的正离子,使靠近支持物的溶液层相对带电,向负极移动,反之,若支持物的离子基团吸附溶液中的负离子,则溶液层向正极移动。电渗作用会影响颗粒的泳动度,因此,在电泳时,电渗小些为好

    5焦耳热电泳时会产生焦耳热,使介质粘度下降,分子运动加快,迁移率增加,同时温度过高会使样品中的生物大分子变性失活,因此电泳时,要控制电压或电流,也可安装冷却散热装置。

    6.支持物

    现代电泳多在固体支持物上进行,使样品中的不同组分形成不同的区带,称区带电泳。电泳结束后,支持物可以方便地进行染色等后续处理。对支持物的一般要求是均匀,吸附力和电渗小,机械性能好,便于染色或紫外光下检测,故更好透明,无紫外吸收。常用支持物有滤纸,醋酸纤维素薄膜,淀粉凝胶,聚丙烯酰胺凝胶,琼脂糖凝胶等支持物性质不同也会影响泳动速率,如琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶都有大小不同的筛孔,在筛孔大的凝胶中溶质颗粒的泳动速率快,反之则慢。

    北京东南仪诚现有北京六一DYCZ-40K转印电泳仪,北京六一DYCZ-25D型双垂直电泳仪,北京六一DYCZ-20H型DNA序列分析电泳仪,北京六一DYCP-44P型快速凝胶电泳仪等,欢迎选购垂询。
 
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