2023年05月31日 13:51:42 来源：广州绿百草科学仪器有限公司 >> 进入该公司展台 阅读量：25
在色谱柱的溶剂入口端收集强吸附物质，在许多情况下，洗涤过程中使用反向流动是有益的。与人们普遍认为的相反，逆流永远不会损害填料良好的色谱柱。提到的流动方向通常是色谱柱*初填充的方向。请注意，不规则/无定形原始二氧化硅在逆流时可能会出现问题，因为可能会重新构造填充床。 当在这些不规则二氧化硅上反转流动时，应始终格外小心。
请检查我们针对不同固定相（ 建议的再生程序， RP、NP、离子交换等 ） 并在这些程序后执行 CoA 色谱柱测试，如果原始压力恢复，以评估色谱柱性能/峰对称性。
清洗和再生程序
如果足够小心，就可以在很长一段时间内保持柱效和可靠性。 本节旨在提供有关有助于延长 HPLC 色谱柱寿命的不同程序的信息。
清洁与再生的区别
我们通常假设，分离后，柱或筒中*初存在的所有物质都已洗脱。运行后，在开始新的分离之前，用2-3柱体积的初始溶剂混合物清洗色谱柱。 但是，如果流动相成分的强度不足以在常规运行期间将其洗脱，则一些强烈保留在色谱柱上的杂质将在进样口处积聚。 发生这种情况时可能会出现一些不可忽视的问题：性能损失、背压增加、峰拖尾、保留时间偏移或基线漂移。 为避免这种情况，强烈建议在出现任何这些症状之前定期清洁色谱柱。 这个过程很简单，不需要修改通常的色谱设置。 当清洁不充分时，可能需要进行更的处理，即再生，以避免丢弃色谱柱。
建议的清洁和再生程序
使用的清洁程序越多，所需的条件就越不严格。 应在色谱柱储存之前或色谱柱似乎堵塞时执行再生程序。 流速通常设置为低于分离期间的流速（ 通常为 20% 至 50% ）。
色谱柱体积（ 包括填料体积 ），单位为 mL = π x [色谱柱半径，单位为厘米] 2 x [色谱柱长度，单位为厘米]
| 柱子 | 建议的清洁程序 | 建议的再生程序 |
|---|---|---|
| Silia Chrom 高效液相色谱柱 | - 设置流量（ 通常的 20% 到 50% ） - 用 2-3 倍柱体积的以下每种溶剂冲洗 | - 反吹色谱柱 - 设置流量（ 通常的 20% 到 50% ） - 用 10 倍柱体积的以下每种溶剂冲洗 |
| 反相柱 （ C18、C8、C4、C1、胺、氰基、苯基、PFP等 ） | - 水/乙腈 (95/5) 以去除缓冲液 - 水/乙腈 (5/95) - 分离过程中使用的流动相 | - 水/乙腈 (95/5) - 四氢呋喃 - 水/乙腈 (5/95) - 分离过程中使用的流动相 |
| 正相柱 （ 胺、氰基、二醇等 ） 注意：切勿用水。 | - MeOH/CHCl 3 (50/50) - 乙酸乙酯 - 分离过程中使用的流动相 | - MeOH/CHCl 3 (50/50) - 异丙醇和乙酸乙酯 - 分离过程中使用的流动相 |
| 非键合硅胶柱 ( 二氧化硅 ) | - 己烷、异丙醇和二氯甲烷 - 分离过程中使用的流动相 | - 己烷、异丙醇和二氯甲烷 - 分离过程中使用的流动相 |
| 离子交换柱 （ SCX、SAX 等 ） | - 5 mM 磷酸盐缓冲液 pH 7.00 - 醋酸/水 (10/90) - 水、甲醇和水 | - 5 mM 磷酸盐缓冲液 pH 7.00 - 醋酸/水 (10/90) - 水、甲醇和水 |
