当样品的进样量在安全范围内时，改变进样量会相应地影响峰高和峰面积。但保留时间、峰宽和分辨率的影响很小。当注射量或质量过大时，会引起过载现象。随着峰宽的增加，峰形变差和分辨率降低是不可避免的

对于长度为50-250mm，内径为4-5mm的色谱柱，单次进样的进样质量应小于50μg，进样体积应小于25μL。过载分为体积过载和质量过载两种，下面将介绍两种过载对分离的影响。

（1） 体积过载：下图显示了分别含有10、40、60、80和100μL的1mg/mL连翘苷的色谱图。可以看出，10μL的峰型*好，40μL的峰面积*大，随着进样量的增加，峰型越明显。

（2） 质量过载：下图是氨基酸及其衍生物的测定，显示了正常和超大质量条件下的峰形状。

过载会影响色谱峰的形状，只有当样品的体积和质量在合适的范围内时，才能得到良好的峰形状。现在，我们将继续讨论哪些因素会导致区域或落后区域。

区域：（拖尾系数<0.95）

1.溶剂效应的影响

（1） 用流动相溶解样品：（姜黄素标准品）

（2） 首先用强溶剂溶解样品，然后用流动相稀释：（石杉碱标准）

2.缓冲作用不当：（注射）

3.仪表系统不正确

在传统液相色谱仪上使用Ultisil®XB-C18柱（4.6×50mm，1.8μm）时，其峰形将受到系统大死体积的影响。

拖尾面积：（拖尾因子<0.95）

1.降低pH值并抑制二氧化硅羟基的电离。

2.增加缓冲盐，提高缓冲效果

3.由于每种缓冲盐的缓冲容量不同，可以通过改变缓冲盐来调整

4.屏蔽二氧化硅的影响（如添加三乙胺）

在我们的定性和定量检测分析中，峰的形状对我们的实验结果有很大的影响，因此确保良好的峰形状是我们实验成功的关键，而异常峰形状的检测和解决当然是我们实验分析的一项重要技能。