在液相色谱实验中，C18色谱柱是常见的一种反相色谱柱。以下是对该柱子进行活化和维护的方法：
1. 活化新柱
- 防脱壳处理：将新柱浸入纯甲醇或乙腈溶液中，旋转或以其它方式使其表面接触至少30分钟。洗去大部分残留有机物之后，用纯水或75％甲醇或乙腈冲洗2-3次直到输出液为无色无味水平。
- 酸碱洗处理：在防脱壳处理完成后，使用0.1-1%的醋酸溶液滴于色谱柱表面并停留约30分钟，并用DI水冲洗干净。然后采用0.1-1%的氨水溶液吸附含氨基的样品于柱子上并停留约30分钟，Z后再次用DI水推出至输出稳定后即可。
- 有机物处理：加入摩尔比1:1的异丙醇和甲酸制成的混合液进柱子中，在流速为0.5 mL/min的条件下梯度洗脱（10% B, 3min; 40% B, 3min; 95% B, 3min，重置至10%过渡三分钟），使其开放性自由胶体的更快恢复。
注意，活化步骤而区地直到输出液为无色无味水平，这一点比较关键。如果您在某些步骤中出现了问题，例如未去除残留有机物、洗涤溶剂未严格控制等，可能会影响到Z终结果。因此，对于分析灵敏性和分辨率较高的分析，请尽可能保持每个步骤的准确性和一致性。2. 柱子的维护
- 保持洁净：用高纯度水、其他常见的有机溶剂进行冲洗，去除表面残留样品、盐和溶液等物质。
- 防止干燥：建议如果长期不使用反相色谱柱，注满一定比例的溶剂并密封。
- 正确使用：使用时应避免太高或太低的流量，以及过强的压力。不使用时封住两端，避免杂质进入。
记得，C18色谱柱的使用寿命大约为100~200次，当输出结果的峰形变得模糊、输出稳定性下降时，请及时更换新柱。
上一篇：如何从柱效、选择性和保留因子三方面提高液相色谱的分离度？
下一篇：Waters 2996 氘灯能量不足，该如何解决？
