紫外可见分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
紫外可见分光光度计的光谱分布范围：
包括波长范围为400~760nm的可见光区和波长范围为200～400nm的紫外光区，不同的光源都有其的发射光谱，因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。
钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的400～760nm波长的光谱，光通过三棱镜折射后，可得到由红,橙,黄,绿,蓝,靛,紫组成的连续色谱；该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
氢灯(或氘灯)的发射光谱：氢灯能发出185～400nm波长的光谱,可作为紫外光光度计的光源。
物质的吸收光谱
(1)如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液，此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱，它出现了几条暗线，即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失，这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱，不同物质的吸收光谱是不同的，因此根据吸收光谱可以鉴别溶液中所含的物质物质的吸收光谱。
(2)当光线通过某种物质的溶液时，透过的光的强度减弱，因为有一部分光在溶液的表面反射或分散，一部分光被组成此溶液的物质所吸收，只有一部分光可透过溶液，入射光=反射光 分散光 吸收光 透过光如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射，分散等因素造成的入射光的损失，则:入射光=吸收光十透过光。
