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液相色谱仪色谱柱的安装和清洗方法

2025年06月27日 08:50:00      来源:成都摩尔科学仪器有限公司 >> 进入该公司展台      阅读量:23

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色谱柱作为液相色谱仪的心脏,那么我们在刚买来的柱子,怎么正确的安装和使用色谱柱之后怎么正确的清洗呢?下面为大家讲讲方法、


一、液相色谱仪色谱柱的安装



标准操作规程(SOP)应为:取A管路放入流动相瓶中→ 拧松泵头 → 流速由0ml/min逐渐升至10ml/min,观察尾液是否呈瀑布状流出(持续10秒) → 拧紧泵头 → 流动相呈抛射状从安装色谱柱的一端喷出(观测是否呈抛物线状,持续5秒) → 流速逐步降至1.0ml/min →安装色谱柱,待20秒后,流动相从色谱柱另一端呈泉水状涌出再安装另一端→ 手握两端螺丝帽,拧紧。


以上安装顺序遵循的是:逐级排放气泡和仪器内存留的洗液。


二、试验后色谱柱的清洗


1、C8柱、C18柱的清洗


液相色谱仪***为常用的C8柱、C18柱。


当流动相仅为乙腈-水或甲醇-水时,流速1.0ml/min冲洗30min,,柱温保持实验时的温度。


水相中有无机盐、表面活性剂或三乙胺、高氯酸等物质时,先采用纯水(或含有2%甲醇),冲洗A管路(实验中采用的管路),时间30min(如流动相中有表面活性剂,则适当增加时间),流速1.0ml/min,柱温可较实验温度高出5~10℃。随后更换成20%甲醇再冲洗30min,流速不变,柱温箱加热装置关闭。结束后取下色谱柱放置阴凉处。


实践证明没必要采用高比例的甲醇冲洗,因为残余有机相中的水相遇到高比例甲醇后在泵头上、色谱柱中会析出少量盐和表面活性剂,导致色谱柱寿命缩短。


2、其他类型的色谱柱


   对于不经常使用的色谱柱类型,******先查询使用、清洗、保存的方法,不能凭感觉操作,否则易造成色谱柱性能急剧下降的后果。


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