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显微镜相衬镜检法术

2026年01月11日 09:47:56      来源:广州思贝舒检测仪器有限公司 >> 进入该公司展台      阅读量:1

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一.相衬镜检法(Phasecontrast)

在光学显微镜的发展过程中,相衬镜检术的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时很难观察到标本。相衬显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现像,将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差,即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。这大大便利了活体细胞的观察,因此相衬镜检法广泛应用于倒置显微镜。

1.  相衬镜检法在装置上与明场不同,有一些特殊要求:

( 1 ) 环状光阑(Ringslit):装在聚光镜的下方,而与聚光镜组合为一体——相衬聚光镜。它是由大小不同的环形光阑装在一圆盘内,外面标有10X、20X、40X、100X等字样,与相对应倍数的物镜配合使用。

( 2 ) 相板(Phase plate):装在物镜的后焦平面处,它分为两部分,一是通过直射光的部分,为半透明的环状,叫共轭面;另一是通过衍射光的部分,叫“补偿面”。有相板的物镜称“相衬物镜”,外壳上常有“Ph”字样。

2. 相衬镜检法是一种比较复杂的镜检方法,想要得到好的观察效果,显微镜的调试非常重要。除此之外还应注意以下几个方面。

 ( 1 )光源要强,全部开启孔径光阑;

 ( 2 ) 使用滤色片,使光波近于单色;

二.微分干涉相衬镜检术(Differential interferencecontrast DIC)

微分干涉相衬镜检术出现于60年代,它不仅能观察无色透明的物体,而且图像呈现出浮雕壮的立体感,并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点,观察效果更为逼真。

1.原理

微分干涉相衬镜检术是利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束。分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等,光束分别在距离很近的两点上通过被检物体,在相位上略有差别。由于两光束的裂距极小,而不出现重影现像,使图像呈现出立体的三维感觉。

2.微分干涉相衬镜检术所需的特殊部件:

(1)起偏镜

(2)检偏镜

(3)渥拉斯顿棱镜2 块

3.微分干涉镜检时的注意事项

(1)因微分干涉相衬灵敏度高,制片表面不能有污物和灰尘。

(2)具有双折射性的物质,不能达到微分干涉相衬镜检的效果。

(3)倒置显微镜应用微分干涉相衬时,不能用塑料培养皿。

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