暗场照明通常用于分析含有明显散射光的纳米材料的生物样品。当与高光谱成像相结合时，它就成为检测嵌入在细胞中的纳米材料的成分和位置的出色工具。 IMA™是Photon等公司的高光谱成像仪，可以配备高效的暗场聚光镜并生成生物样品的高对比度图像。

Photon Etc.高光谱滤光片的高通量可以快速采集光谱分辨的高分辨率图像。由于相机捕获了视场中的整个区域，因此可以实时收集光谱和空间信息，并且可以记录光谱分辨的视频以跟随细胞和发光纳米级成分的动态变化。 Photon Etc.的软件PHySpec ™ 支持主成分分析（PCA），以识别单个和聚集的纳米粒子的最小变化。

为了展示IMA ™ 分析生物系统中纳米材料 的能力，MDA-MB-23人乳腺癌细胞样品已用60 nm金纳米颗粒（GNP）标记，并整个暴露于暗场照明视场（图1）。用60X物镜的150x112的区域微米²进行成像，为2的步骤 纳米和为2的曝光时间 每波长秒。完整的分析仅用了几分钟，就获得了超过一百万个光谱，每个光谱都覆盖了整个可见光谱。

细胞通常具有平坦的散射光谱，而GNP在550 nm 附近显示一个尖峰。图2说明了从乳腺癌的暗场高光谱立方体中提取 的550 nm图像。PCA软件处理后，GNP用绿色标记。

乳腺癌细胞的放大倍数（图3a）和含有GNP的区域的光谱（图3b中的某些示例）证实了单个60 nm NP（550 nm 峰）及其聚集体（峰红移）的存在。高光谱相机未在细胞之间的区域中检测到任何GNP。

结果由加拿大魁北克蒙特利尔蒙特利尔理工学院的David Rioux，ÉricBergeron和Michel Meunier提供。