湿转是Western Blot实验中核心的蛋白转印技术，也是科研领域应用成熟、稳定性最高的转膜方式，核心原理是利用电场驱动蛋白分子，在浸没的缓冲液体系中从凝胶转移至PVDF或硝酸纤维素膜上。该技术通过构建海绵、滤纸、凝胶、转印膜、滤纸、海绵的“转膜三明治”结构，按照负极为凝胶侧、正极为膜侧的顺序组装，全程浸泡在转膜缓冲液中，通电后实现蛋白定向迁移固定。 相较于半干转，湿转的优势是缓冲液体系充足、散热均匀，可有效避免转膜过程中温度过高、蛋白降解、转印不均等问题，适配性强。尤其针对100kDa以上的大分子量蛋白，湿转能保障充足的迁移时间和稳定的电场环境，转印效率和完整性远超其他方式，也支持过夜低速转膜，适配难转移蛋白的实验需求。
常规湿转采用恒流200-300mA条件，根据蛋白分子量调整时长，小分子蛋白1小时即可完成，大分子蛋白可延长至1.5-2小时。虽存在缓冲液用量大、操作流程稍繁琐的特点，但凭借极低的实验失败率、稳定的转印效果，始终是基础科研、精准蛋白检测实验的转膜方案，广泛应用于生物医学、分子生物学等领域的蛋白定性与定量分析。
